PCR 實驗室項目介紹： PCR技術在整個生命科學領域具有很高的性，但是，如果缺乏對PCR技 術完整深入的了解，以及相應的質量措施，就會導致檢驗結果有很大的主觀 性和隨意性，常常出現(xiàn)假陽性和假陰性。
根據(jù)基因擴增檢驗技術的特點和臨床疾病診斷的需要，國家衛(wèi)生部于2002 年1月下發(fā)了《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》，對基因擴增檢驗實驗室 的設置、技術驗收、人員培訓、監(jiān)督管理等作了全面的規(guī)定，要求從事臨床基因 擴增檢驗的技術人員經(jīng)過上崗培訓，持證上崗。臨床基因擴增檢驗實驗室是 整個PCR實驗的操作場所，它的設置是否合理直接影響到PCR實驗結果的準確 性，所以它按照國家衛(wèi)生部頒布的《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》 進行設置。
PCR實驗室系統(tǒng)介紹
標準PCR實驗室是一種規(guī)格、大小、排列、布局、設置、工作規(guī)范、操作程 序和管理制度等都一定，且經(jīng)過多位和多家醫(yī)院反復論證，并符合國家衛(wèi)生 部的《臨床基因擴增檢測實驗室基本設置標準》要求的臨床基因擴增檢驗實驗室。 它采用全自動熒光定量PCR檢測系統(tǒng)，只要設置三個工作區(qū)域，即：試劑準備區(qū)， 標本制備區(qū)和PCR擴增區(qū)。
它將三個工作區(qū)域按理想的狀態(tài)排列在一起，在三個工作區(qū)域前各設置一個緩沖區(qū)，如圖１所示：

在三個緩沖區(qū)內設有掛衣架和整理盒，可供工作人員換工作服和工作鞋使 用。每間實驗室和緩沖區(qū)頂部都安裝有照明燈、紫外線燈和排風扇。 （一）標準PCR實驗室設計原則
1、標準PCR實驗室的工作區(qū)
（1）試劑準備區(qū) 設置有實驗桌、柜子、冰箱、可移動紫外燈、與標本制備區(qū)連通的傳遞窗和 椅子，在實驗桌上可放置實驗儀器設備（包括離心機、震蕩器、移液器、離心管、 廢液缸和垃圾筒等）。
（2）標本制備區(qū) 設置有實驗桌、生物安全柜、冰箱、可移動紫外燈、水槽和椅子，在實驗桌 上和生物安全柜內還放置有實驗儀器設備（包括離心機、恒溫金屬浴、移液器、 離心管、廢液缸和垃圾筒等）。
（3）PCR擴增區(qū) 設置有實驗桌、柜子、與標本制備區(qū)連通的傳遞和椅子，在實驗桌上放置有 實驗儀器設備（包括定量PCR擴增儀、電腦、打印機、廢液缸和垃圾筒等）。
標準PCR實驗室如圖２所示，前面設置有走廊，走廊的一側是各實驗區(qū) 的緩沖區(qū)。三間實驗區(qū)的布置依次為試劑準備區(qū)，標本制備區(qū)以及PCR擴增區(qū)。
2.標準PCR實驗室各工作區(qū)之間注意事項 各工作區(qū)有明確的標記，避免不同工作區(qū)域內的設備、物品濫用。 進入各工作區(qū)域嚴格按照單一方向進行，即：試劑準備區(qū)→標本制備區(qū) →PCR擴增區(qū)。 不同的工作區(qū)域使用不同的工作服，工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工 作服帶出。
（二）氣流方向設置 為了防止環(huán)境對擴增產(chǎn)物的影響，按臨床基因擴增實驗室調協(xié)要求，各實驗 區(qū)的氣流設置方向為：空氣由試劑準備區(qū)流向緩沖區(qū)Ⅰ，標本制備區(qū)流向緩沖區(qū) Ⅱ，緩沖區(qū)Ⅲ流向PCR擴增區(qū)（如圖2所示）。
因此，工作時，應使緩沖區(qū)Ⅰ、 緩沖區(qū)Ⅱ和PCR擴增區(qū)為負壓，其他各室為“0”壓或“+”壓?？纱蜷_緩沖區(qū)Ⅰ，緩 沖區(qū)Ⅱ和PCR擴增區(qū)的排風扇往外排氣，并且在實驗區(qū)的外墻上各扇門上都安裝

PCR標準實驗室特點
（1）布局理想的結構 標準PCR實驗室采用全自動熒光定量PCR檢測系統(tǒng)，所以只設置三間實驗區(qū)， 即：試劑準備區(qū)，標本制備區(qū)和PCR擴增區(qū)以及相應的緩沖區(qū)Ⅰ緩沖區(qū)Ⅱ和緩沖 區(qū)Ⅲ。將實驗區(qū)和緩沖區(qū)按如圖1所示布局，使工作人員在進入實驗區(qū)之前 入緩沖區(qū)更換工作服，試劑和標本通過傳遞直接傳入標本制備區(qū)和PCR擴增區(qū)。
（2）標準的氣壓設置要求 為了防止整個PCR實驗過程中試劑和標本受到氣溶膠的污染以及擴增對人員 和環(huán)境的污染，標準PCR實驗室內各實驗區(qū)設置了一定的相對氣壓，從設施上保 證人員、環(huán)境和標本的安全性。
（3）嚴謹?shù)姆雷o措施 標本制備區(qū)內部安裝有生物安全柜，標本制備在生物安全柜內進行，生物安 全柜的通風系統(tǒng)了人員和標本的安全性，防止氣溶膠對人員和標本的污染， 生物安全柜內部的潔凈度達到100級。 在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及生物安全柜和傳遞內部安裝有紫外燈， 供消毒用。試劑和標本通過電子連鎖不銹鋼傳遞，試劑和標本在傳遞過程中 不會受到污染。 在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū)設置移動紫外燈，對實驗桌時行局部消毒。
（4）簡明潔凈的外觀 SL－6040A標準PCR實驗室主要由彩鋼板、鋁合金型材和玻璃等材料構成， 其四角采用鋁合金圓角立柱支撐，實驗室內角采用鋁合金內圓角裝飾，結構牢固， 線條簡明，美觀大方，密封性好。
（5）模塊化設計 部件由原廠內部測試，現(xiàn)場拼裝。能大批量生產(chǎn)，生產(chǎn)，質量穩(wěn)定可 靠，使成本得到有效的控制，安裝方便。
（6）標準化設計 設定標準規(guī)格的實驗室尺寸，充分節(jié)約空間，滿足不同客戶的需要，并提供 標準化的質量管理文件范文（包括質量手冊，程序文件，SOP文件）。實驗室的 設置和質量管理文件都經(jīng)過多位和多家醫(yī)院的論證，符合國家衛(wèi)生部驗收標 準。
（8）集中控制 所有的開關都安裝在開關面板上集中控制。
（9）人性化設計 在各實驗區(qū)的工作臺、傳遞窗、水槽和水龍頭的位置，都根據(jù)人體工程設計。 并且，在各實驗區(qū)都預留有電話、網(wǎng)絡和空調的接口。如下圖所示：


2、整體標準化PCR實驗室技術參數(shù)要求
1) *實驗室為整體標準化實驗室，可以整體搬遷，以適合改變實驗場所時搬遷使 用，節(jié)約成本。
2) 標準的三區(qū)分隔和氣壓調節(jié)：將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增 檢測三個立的實驗區(qū)。每個立實驗區(qū)設置有緩沖區(qū)，同時各區(qū)通過氣壓調節(jié)， 使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和 環(huán)境的污染。
3) 紫外燈消毒：在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳遞窗內部安裝有紫外燈， 供消毒用。在試劑準備區(qū)和標本制備區(qū)還設置移動紫外線燈，對實驗桌進行局部 消毒。
4) * 排風管道系統(tǒng)：可打開緩沖區(qū)I、緩沖區(qū)II和PCR擴增區(qū)的排風扇向外排氣， 在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調的回風口，空氣通過回風口向室 內換氣。
5）電子連鎖不銹鋼傳遞窗：試劑和標本通過電子連鎖不銹鋼傳遞窗傳遞， 試劑和標本在傳遞過程中不會受到污染。
6) *安全密封；主體為彩鋼板、鋁合金型材、和玻璃。采用鋁合金圓角立柱支撐， 扣件和粘接部位設計合理周到，結構牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。
7) 具有可置放實驗衣的衣鉤，集中控制的開關面板。
8) 每個實驗室都配備電話網(wǎng)絡接口，使用感應水龍頭和不銹鋼水槽。
9) 按照人體工學原理設計的工作臺面，方便實驗人員操作。
10) 回風口可進行氣壓調節(jié)，濾網(wǎng)能夠防蟲防塵，方便清洗。
11) *實驗室能夠在大小為6.0m×4.5m×3.0m(L×W×H)的空間安裝。
12) 實驗室能夠達到國家臨檢中心的驗收標準，并協(xié)助使用單位達標。

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