胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)

貨號(hào)：LZ-PYJ4071

英文名稱：Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base

產(chǎn)品規(guī)格：250g

用途：用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試驗(yàn)。

添加劑：每瓶需配套添加脫纖維養(yǎng)血使用。

成分(g/L)：

胰酪胨 15.0g

大豆胨 5.0g

氯化鈉 5.0g

瓊脂 15.0g

PH值 6.8-7.2

用法：稱取本品40.0克，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝燒瓶，每瓶100ml，121℃高壓滅菌15分鐘，冷至45-50℃時(shí)加入5ml無(wú)菌脫纖維羊血，混勻后傾注平板，每平皿18-20ml.

質(zhì)量控制和典型特征：

在30-32℃培養(yǎng)18-24小時(shí)，蠟樣芽孢桿菌典型特征：為在菌落周圍呈現(xiàn)β型完全溶血的溶血環(huán)。

配制過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題分析：

01 培養(yǎng)基顏色不正確

（1）含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基，若顏色不正確，通常是由于pH不正確導(dǎo)致的，加熱過(guò)度、錯(cuò)誤的滅菌方式等都會(huì)導(dǎo)致此項(xiàng)問(wèn)題。

（2）加熱過(guò)度導(dǎo)致某些成分分解或糖焦化，如SC培養(yǎng)基(SC增菌液)加熱過(guò)度會(huì)變紅，含糖量高的培養(yǎng)基，加熱過(guò)度通常會(huì)出現(xiàn)顏色加深，呈焦糖色或棕褐色。

（3）某些成分變質(zhì)，如血液久置易變黑，制成的平板顏色偏棕黑色。

02 培養(yǎng)基不凝固或凝固性差

（1）顆粒培養(yǎng)基稱量錯(cuò)誤

（2）瓊脂分布不均勻

（3）培養(yǎng)基pH不正確

（4）培養(yǎng)基加熱過(guò)度

（5）瓊脂量不足

03 培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀

（1）某些培養(yǎng)基原本就含有不溶性沉淀，如TTB，MC培養(yǎng)基等，配方中含有大量不溶性碳酸鈣。

（2）滅菌前未充分溶解，若滅菌前溶解不充足，滅菌后就會(huì)出現(xiàn)大量沉淀。

（3）pH不正確，偏酸或偏堿都有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀。

（4）水的純度不夠，天然水中含有較多的礦物鹽離子，若未除凈，則易與培養(yǎng)基中反應(yīng)生成沉淀。

（5）添加劑加入溫度不正確，卵黃、血液等對(duì)溫度敏感的添加成分，若加入時(shí)溫度過(guò)高或溫差過(guò)大，易出現(xiàn)凝塊。

（6）稱量錯(cuò)誤。

（7）試劑加入順序不正確。

注意事項(xiàng)：

1）培養(yǎng)基盡量使用新鮮培養(yǎng)基，2～4h內(nèi)用完；

2）上海應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基，預(yù)還原24～48h更好；

3）可采用預(yù)還原滅菌法制作的培養(yǎng)基（用前于培養(yǎng)基中加入還原劑，如L-半胱氨酸、維生素C等，盡可能使預(yù)還原劑處于還原狀態(tài)）；

4）液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸10min，以驅(qū)除溶解氧，并迅速冷卻，立即接種醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)搜集整理；

5）厭氧菌的培養(yǎng)基均應(yīng)營(yíng)養(yǎng)豐富，并加有還原劑與生長(zhǎng)刺激因子（血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等）。

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